GST-瓊脂糖凝膠FF

英文名稱(chēng)：GST- Berpharose FF

貨號(hào)：B2821

規(guī)格：1ml

1.產(chǎn)品介紹

GST-瓊脂糖凝膠FF是一種將谷胱-甘肽鍵合在瓊脂糖凝膠微球上形成的生物親和層析分離介質(zhì)。該產(chǎn)品保留了瓊脂糖極-好的親水性及大網(wǎng)架結(jié)構(gòu)，與生物活性大分子有很好的相容性，具有載量高、非特異性吸附少、流速快等特點(diǎn)，主要用于谷胱-甘肽轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記蛋白（GST融合蛋白）、谷胱-甘肽轉(zhuǎn)移酶和谷胱-甘肽依賴蛋白的分離純化。

2.規(guī)格

1ml（預(yù)裝柱）、5ml（預(yù)裝柱）、10ml（預(yù)裝柱）、20ml、100ml、500ml 使用方法：

①推薦緩沖液:

平衡緩沖液：10 mM PBS（140 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 1.8 mM KH2PO4, pH 7.3）。

洗脫緩沖液：50 mM Tris-HCl, 10 mM還原型谷胱-甘肽（GSH）, pH 8.0

②平衡

用平衡緩沖液以操作流速平衡層析柱，觀察檢測(cè)器的變化，直到電導(dǎo)率、pH值等參數(shù)不變。

③上樣

切換轉(zhuǎn)換閥進(jìn)行上樣，上樣量根據(jù)樣品的性質(zhì)和層析介質(zhì)的量進(jìn)行選擇，也可進(jìn)行線性實(shí)驗(yàn)找到最佳上樣量。樣品的預(yù)處理：置換緩沖液，澄清過(guò)濾（0.45μm、0.22μm）等。

④沖洗

用2~3個(gè)柱體積的平衡緩沖液沖洗上樣后的層析柱，觀察檢測(cè)器的變化，直到電導(dǎo)率、pH等參數(shù)不變。此時(shí)未交換的組分將被清洗出去。

⑤洗脫

一般推薦用10 mM還原型谷胱-甘肽溶液（可含緩沖成分）進(jìn)行洗脫。

⑥再生

用蒸餾水按操作流速?zèng)_洗3~5個(gè)柱體積，接著用平衡液洗到平衡3~5個(gè)柱體積。再生時(shí)若有失活的蛋白質(zhì)或脂類(lèi)物質(zhì)洗不掉，可用在位清洗（CIP）法除去。

⑦在位清洗(CIP)

去除沉淀和變性蛋白：用2個(gè)柱體積的6 M鹽酸胍清洗，立即用10 mM PBS（pH7.4）洗5個(gè)柱體積。去除強(qiáng)疏水蛋白：用3~4個(gè)柱體積的70%乙醇清洗，立即用10 mM PBS（pH7.4）洗5個(gè)柱體積。

6.注意事項(xiàng)：

1)使用時(shí)保證柱子和緩沖液的溫度一致，避免柱床內(nèi)產(chǎn)生氣泡，影響純化效果。

2)本產(chǎn)品保存條件為20%乙醇，4~8℃。

3) 2-25℃,常壓,避光運(yùn)輸。

4)僅供科研實(shí)驗(yàn)使用。